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2022-06-09 09:36:32
免疫荧光
一、实验原理
免疫荧光（IF），是应用抗原与抗体特异性结合的原理，通过荧光标记抗体对组织细胞内抗原进行定位、定性及定量的研究。
免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性，所以当抗原抗体发生反应时，只要知道其中的一个因素，就可以查出另一个因素。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体（或抗原）上，与其相应的抗原（或抗体）结合后，在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。
二、应用简介
目前主要可以对石蜡切片、冰冻切片、细胞爬片、组织芯片进行免疫荧光检测。
免疫荧光技术可用于：（1）研究特异蛋白抗原在细胞内分布；（2）对抗原进行细胞定位；（3）对特定抗原进行定量检测
三、实验方法
四、样本送检要求
五、案例展示
六、常见问题
1、无/弱染色
烤片温度过高，推荐56℃-60℃1-2h；
一抗是否适用固定液和石蜡切片，使用浓度是否过低，孵育是否时间过短等。
2、非特异性背景染色
是否灭活内源性过氧化物酶；
孵育过程中干片；
抗原热修复过度。
3、染色过深
一抗浓度过高；
染色试浓度过高或孵育时间过长；
染色剂浓度过高或孵育时间过长。
七、服务流程
