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2022-06-09 10:05:14
Northern杂交
一、 实验原理
Northern杂交采用琼脂糖凝胶电泳，将分子量大小不同的RNA分离开来，随后将其原位转移至固相支持物（如尼龙膜、硝酸纤维膜等）上，再用放射性（或非放射性）标记的DNA或RNA探针，依据其同源性进行杂交，最后进行放射自显影（或化学显影），以目标RNA所在位置表示其分子量的大小，而其显影强度则可提示目标RNA在所测样品中的相对含量（即目标RNA的丰度）。
二、应用简介
1、定性及定量分析基因转录水平差异；
2、检测目的基因是否具有可变剪切产物或者重复序列。
三、 实验方法
四、样本送检要求
五、案例展示
六、常见问题
1．RNA极易被环境中存在的RNA酶降解，因此须特别警惕RNA酶的污染。操作时必须仔细、小心，严格按同位素操作规程进行，以防止同位素污染。
2．必要时，可采用Sephades G-50柱层析法纯化标记的探针，以去除标记反应中未结合的（游离的）核苷酸。
七、服务流程
